什么是中性粒细胞胞外陷阱(NETs)?中性粒细胞,作为宿主防御感染的“先遣部队”,主要通过三种方式作战:吞噬、脱颗粒和形成中性粒细胞胞外陷阱(NETs)。NETs的形成是一种新型细胞死亡模式,与凋亡和坏死不同,这一过程被称为中性粒细胞的炎性细胞死亡(NETosis)。在此过程中,细胞核膜破裂,染色质去凝集,细胞核、细胞质和颗粒成分混合,最终形成一种由DNA和蛋白质交织而成的网,以捕获周围的微生物病原体。
流式细胞术已成为研究NETs的重要工具。惠灵顿奥塔哥大学和维多利亚大学的研究团队开发了一种基于全光谱流式细胞术的NETs检测方案。他们通过从外周血中分离粒细胞,并识别中性粒细胞附着的胞外DNA及多种NET相关的颗粒蛋白,从而能够区分NETosis和坏死细胞。采用3激光配置的Cytek®Aurora™全光谱流式细胞仪进行检测,结果显示,其对小方案的检测同样表现出了优越的性能。
研究人员还优化了NET+中性粒细胞的染色条件和门控策略。在体外实验中,他们通过不同浓度的PMA刺激外周血中的粒细胞以诱导NETs的形成。测试结果表明,适宜的PMA浓度应在19-133nM之间。随后,采用CytekAurora全光谱分析型流式细胞仪进行数据采集和分析,结合CD标记表征中性粒细胞,从而有效识别出NET+中性粒细胞。
在检测炎性疾病患者的外周血样品时,研究人员发现,急性心肌梗死(AMI)患者的NET+中性粒细胞数量显著高于稳定性冠心病(Stable CAD)患者,这表明该检测方案在炎症状态下同样能够特异性识别NET+中性粒细胞。
综上所述,研究团队构建的CytekAurora全光谱分析平台在NETs检测中的应用,提高了其量化检测的特异性和准确性。该新方案准确识别NET+中性粒细胞的多种表型,通过分析与中性粒细胞相关的蛋白质,为急性炎症患者的NET+中性粒细胞累积评估提供了重要工具,展现出极大的临床应用潜力。基于全光谱流式技术,今后还有望拓展到凋亡检测和其他细胞类型的外洽陷阱形成研究,为生物医疗领域提供更丰富的思路和应用。
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