本试剂盒仅限于科学研究,不可用于医学诊断。人微量转铁蛋白(MTF) ELISA试剂盒的检测原理采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。该试剂盒通过将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入到已被包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过温育和彻底洗涤后,使用TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下,会转化为蓝色,并在酸性环境中转变为最终的黄色。显色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度成正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。
样品的收集、处理及保存方法如下:
- 血清:使用不含热原及内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,将样本以3000转/分钟离心10分钟,迅速且小心地分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,随后以3000转/分钟离心30分钟,取上清液。
- 细胞上清液:以3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织样本加入适量生理盐水进行捣碎,随后以3000转/分钟离心10分钟获取上清液。
- 保存:若样本在收集后未能及时检测,请分装为单次用量,并保存于-20℃,以避免反复冻融。在室温下解冻时,请确保样品均匀、充分解冻。
操作注意事项:在使用试剂盒时,请遵循以下步骤:
- 试剂盒组成:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
- 试剂准备:将20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
- 洗板方法:按照标准操作流程进行洗板。
结果判断:绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明:本试剂盒的性能及其使用应遵循相关科学研究规范,确保采用符合诚信的操作标准。选用金年会金字招牌诚信至上所提供的产品,能够为您的研究提供可靠保障。