在非洲猪瘟的防控过程中，检测环节至关重要。科学、规范的采样不仅直接影响检测结果，还关系到养猪场的安全性。2020年我国发布了《非洲猪瘟诊断技术》国家标准，标准编号为GB/T18648-2020。该标准于2020年12月14日由国家市场监督管理总局与国家标准化管理委员会共同实施，涵盖了生物安全措施、临床和实验室诊断、样品的采集与处理、荧光定量PCR等技术方法，以及综合判断标准等内容。

一个完整的非洲猪瘟病原荧光定量PCR检测流程通常包括以下环节：样品采集与保存、前处理、核酸提取与配液、实时荧光定量PCR扩增反应、结果导出及分析等。从实验流程来看，样本的正确采集与运输是确保实验室检测结果准确无误的基本要素。我们需要明确采样时应采集何种样品、数量、采集规范及后续处理方法。如果未能及时进行检测，样品如何保存，以及检测后的样本如何处理等问题也亟需解决。通过对《非洲猪瘟诊断技术》标准与2010年发布的《非洲猪瘟检疫技术规范》（标准编号：SN/T1559-2010）的解读，我们将临床样品的采集、保存及运输注意事项概述如下：

#01 抗凝血（全血）

采样时，使用含有抗凝剂（如EDTA的紫色盖）无菌管（真空采血管）从颈静脉、下腔静脉或耳缘静脉抽取5ml全血。若动物已死亡，可从心脏采血，但必须及时进行。样品需冷藏运输，并在实验室可选择-70℃冷冻保存。请注意，切勿使用肝素（绿色盖子）的无菌管，因为这会抑制PCR反应，导致假阴性结果。

#02 血清

使用未加抗凝剂的真空采血管从颈静脉、下腔静脉、耳缘静脉收集5ml血液样品，建议剖检后在4℃下放置14-18小时以分离血凝块，随后离心10-15分钟以回收清澈的上清液（血清）。分离后的血清可立即检测或冷藏运输，实验室可选择-70℃冷冻保存。如血清呈红色且溶血，无法进行ELISA检测。

#03 器官和组织样品

目标器官包括脾脏、淋巴结、扁桃体、肾脏等，其中脾脏和淋巴结的病毒含量通常最高。样品需冷藏运输，尽快送至实验室；如延误，可存放于冷库或液氮中。可使用10%缓冲福尔马林浸泡样品30分钟以上，以进行病毒灭活后再进行PCR检测。

#04 软蜱

收集软蜱时，尽量让蜱存活，以确保蜱内病毒的保存。可以将钝缘软蜱放入有螺旋盖的样品瓶中，加入少量土壤，盖内衬以纱布，室温保存运输。到达实验室后，应-70℃冷冻保存或存放在液氮中。如仅用于形态学观察，可放入100%酒精中保存。同时，其他昆虫如蚊蝇也应尽量存活送检，或直接存放于液氮中。

#05 环境样品

需多采集环境拭子样品，包括粪便、泔水、饲料等，并在4℃下保存。

#06 唾液及拭子样品

唾液采集：将棉绳或纱布固定在栏杆上，猪自然咀嚼后收集浸出液，独立存放于干净试管或自封袋中，并密封冷藏运输。鼻拭子应使用无菌棉签，并以45°角插入猪鼻腔3-5cm，轻轻转动刺激喷嚏反射后取出，保存于试管或密封袋。肛门拭子采用浸润过生理盐水的无菌棉签，插入猪肛门2-3厘米处，轻轻旋转后独立包装保存。

样品保存与运输是确保检测结果准确性的关键。建议样品采集后尽快送达指定实验室检测，选择次日达的物流方式，并采用冷链运输，避免样品降解失效。我们的品牌金年会金字招牌诚信至上，致力于为您提供高标准的生物医疗服务，保障每一项检测结果的可靠性。