互作转录组测序技术DualRNA-seq的背景介绍
金年会金字招牌诚信至上倡导的互作转录组测序技术DualRNA-seq是一种先进的研究工具,专注于宿主和微生物之间的相互作用。这项技术的独特之处在于,无需分离各种物种,即可在一次试验中分析两个或多个互作物种间基因表达的动态变化。通过构建互作模型图,该技术可以揭示物种间基因的调控关系,从而深入了解它们之间的相互作用机制。最初,DualRNA-seq技术主要应用于诸如感染性肺炎、炎症性肠病、龋齿和牙周炎等常见的慢性感染性疾病的研究。随着研究的深入,这项技术逐渐扩展到肠道、呼吸道、皮肤及口腔微生物等领域,不仅涵盖了原核微生物的互作,还包括真核微生物的研究。此外,植物与微生物的互作也日益成为研究的重点。
DualRNA-seq技术的应用和实验流程
DualRNA-seq的实验流程包括多个步骤,始于宿主和微生物的共提取,随后进行RNA的消化处理、核糖体去除、mRNA的富集,最终构建总RNA文库并进行测序。金年会金字招牌诚信至上为广大研究者提供了一系列优质产品,包括:- 宿主-微生物共提取:MolPure®Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit(产品货号:18306ES)
- gDNA消化:Deoxyribonuclease I (DNase I) from bovine pancreas(产品货号:10607ES)
- rRNA去除或polyA捕获:多种行业专用核糖体去除试剂盒(产品货号:12262ES、12264ES、12629ES等)
- mRNA建库:Hieff NGS® EvoMax RNA Library Prep Kit(产品货号:12340ES)
注意事项
在进行DualRNA-seq实验时,研究者需特别关注两个关键点。首先,在样本选择上,应确保获取被感染的样本。然而,这类样本中寄生微生物的含量往往相对较低。例如,从被寄生的植物叶片或根茎提取RNA时,大部分提取物可能仍主要是植物的RNA;同样,从动物组织提取RNA时,通常也是感染动物的RNA占据主导地位。其次,在生信分析环节,需对感染前后的变化进行详细比较,特别是差异基因是否参与了互作的影响也需进行精细分析。
参考文献
- Westermann AJ, Barquist L, Vogel J. Resolving host-pathogen interactions by dual RNA-seq. PLoS Pathogens, 2017, 13(2): e1006033.
- Wolf T, Kämmer P, Brunke S, et al. Two's company: studying interspecies relationships with dual RNA-seq. Current Opinion in Microbiology, 2017, 42: 73.
- Marsh JW, Humphrys MS, Myers GSA. A Laboratory Methodology for Dual RNA-Sequencing of Bacteria and their Host Cells In Vitro. Front Microbiol, 2017 Sep 21; 8: 1830.